原型物種人

來源注射 GP-APS導致特發性紫癜

模式動物品系SPF級Balb/C小鼠，雄性，周齡為8w-10w，體重為30g-35g。

實驗分組實驗分六組：正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組。

實驗周期4-6 weeks

建模方法一、分離血小板的方案：
小鼠眶靜脈取血，置于抗凝離心管中,靜置30min后離心，800rpm離心10min，上清液即為富含血小板的血漿。吸出上清液置于干凈試管中，3500rpm離心10min，棄去上清液,管底沉淀物為血小板。向試管中滴加50～100μl質量濃度為1％草酸銨溶液，以玻璃棒輕輕攪拌，再加入質量濃度為1％草酸銨溶液2～3ml，靜置5min，使紅細胞溶解。3500rpm離心10min,棄去上清，加入血小板洗滌液并反復吹打,使成為血小板混懸液，3300rpm離心10min，棄去上清，加入少量血小板洗滌液并反復吹打使之成為混 懸液。該血小板將作為抗原免疫豚鼠后，取豚鼠血清給小鼠注射，制備過敏性紫癜模型。此方法操作簡單，可以得到高濃度的血小板，并很好地解決血小板 純度不佳的問題。
二、抗體血清免疫豚鼠：
1.取以上血小板與等量完全弗氏佐劑混合，乳化油包水狀，于0周注射豚鼠足掌，背，皮下至少4點；
2.血小板于等量不完全弗氏佐劑混合，乳化油包水狀，于1，2，4周注射豚鼠足掌，背，皮下至少4點，每個點100ul；
3.第5周從豚鼠心臟取血，3000r/min 離心10min后取上清，即為豚鼠抗小鼠血小板血清(GP-APS)；
4.置56度水浴30min補體滅活，生理鹽水稀釋后，-20度冰箱儲存備用。
三、小鼠紫癜建模方案：
隔日注射豚鼠抗小鼠血小板血清(GP-APS)建立ITP小鼠模型，0，2，4，6，8，10d按照100ul/20g體重腹腔注射1:4稀釋的豚鼠抗小鼠血小板血清(GP-APS)。

應用疾病模型