原型物種
來源
模式動物品系
實驗分組
實驗周期
建模方法
應用
1、體質重測定:分別于0d、7d、14d、21d、28d記錄大鼠的體重,比較模型組大鼠體重和對照組大鼠的體重變化;
2、免疫評價:
稱量大鼠體重,處死大鼠,取出脾和胸腺,生理鹽水漂洗后用紗布吸干表面水分,分別于電子天平上稱質量(濕質量),并計算臟器指數。
臟器指數 = 器官濕質量(mg) /大鼠體重(g)
3、足跖腫脹值(mm)測定:
足趾腫脹度是佐劑性關節炎測量的一個重要指標。0d時在大鼠足跖同一地方做標記,用電子游標卡尺以標記為準,測定大鼠足跖厚度,以后每隔7d(7、14、21d和28d時)再分別測量,進行自身左右側足跖對照和組別間對照。
4、關節炎指數(arthritisindex index,AI)評價:
采用關節炎指數積分評價其關節炎癥程度。除了誘導部位右后足以外,根據其余3只未注射的肢體病變程度和趾間是否發炎對每一足爪分別進行打分,以0~4分記錄,累積得分即為每只大鼠的關節炎指數。
0分:無紅斑和腫脹的證據;
1分:紅斑和輕度腫脹局限于足中段或踝關節;
2分:紅斑和輕度腫脹從踝關節蔓延至足中段;
3分:紅斑和輕度腫脹從踝關節蔓延至關節;
4分:紅斑和重度腫脹包括了踝、足和趾;
處死大鼠,留取剔除軟組織的后肢踝關節,固定、脫鈣、包埋、石蠟切片后行HE染色作組織學觀察。正常大鼠踝關節結構正常,無炎性細胞浸潤,滑膜細胞排列整齊,軟骨表面光滑,關節腔內未見滲出液;模型組大鼠關節破壞明顯,周圍大量中性粒細胞浸潤,滑膜增生肥厚,纖維組織增生,軟骨及骨骼損傷。
大鼠3%戊巴比妥鈉麻醉后,于下腔靜脈取血1ml,靜止30min, 4℃離心機4000r/min離心30min,分離出上層血清,置-80℃冰箱保存備用。使用ELISA試劑盒檢測TNFα、IL-1β等細胞因子的含量。
應用SPSS軟件進行統計分析,計量資料以均數±標準差(x ±s)表示,采用t檢驗,組間比較采用單因素方差分析,P<0.05表示有顯
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