原型物種人

來源缺血再灌注

模式動物品系SD大鼠，SPF級，健康，雄性，體重：200g~220g

實驗分組對照組，模型組，陽性藥物組，受試藥物組，15只每組

實驗周期24hrs, 72hrs

建模方法1.選取體重250g-300g大鼠，行術前12 h禁食，自由飲水。
2.15%水合氯醛350mg/kg腹腔注射麻醉，麻醉成功后將大鼠平躺在手術臺上膠帶固定四肢，將大鼠腹部至劍突術區剃毛 ，用 10％碘酒和75％乙醇術區消毒。
3.取腹正中切口1cm，打開腹腔，小心分離出肝臟左、中葉之肝蒂（左、中葉肝臟供血的門靜脈和肝動脈）。
4. 用無創血管夾夾閉中葉和左葉的門靜脈和肝動脈，使約70%的肝臟缺血，以防止發生嚴重腸系膜靜脈淤血。0.5min后，與非阻斷的右葉相比，肉眼可見阻斷葉明顯變白，說明阻斷成功，用止血鉗夾閉皮膚切口臨時關閉腹腔，同時將大鼠放在37℃恒溫加熱墊上保溫。
5. 完成持續缺血60min后，重新打開腹腔，迅速取出血管夾，恢復缺血肝血流，0.5min左右可見缺血區肝臟由白色逐漸恢復為鮮紅色表明再灌注成功，逐層縫合腹腔肌肉和皮膚關閉腹腔，完成手術。待大鼠清醒后放回飼養室飼養，密切關注大鼠的狀態及生存狀況并做好記錄。
6. 術后分別于再灌注0h、3h、6h、12h、24h及72h處死大鼠，下腔靜脈取血1ml，室溫靜置2h后于4℃3000r離心10分鐘提取血清，放入-80冰箱凍存。采用全自動生化分析儀檢測血清中ALT（谷丙轉氨酶）、AST（天門冬氨酸氨基轉移酶）的水平。同時統一取肝左葉組織1．5cm×1cm×0．2cm留作病理標本或分生標本。

注意事項
1.分離肝門時用棉簽分離，可避免對肝臟的損傷
2.術前禁食有利于手術進行
3.阻斷血流要一次成功，否則會造成缺血預處理，減輕損傷程度
4.再灌后用棉簽輕輕按壓肝臟，有利于血流恢復
5.取材時鑷子不要損傷肝臟

應用疾病模型