原型物種人

來源A549細胞肺轉移瘤

模式動物品系SPF級Balb/c-nude 裸鼠，健康，雄性，4~5W，體重為18g~20g。

實驗分組實驗分六組：正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組。

實驗周期4-6 weeks

建模方法細胞系： 熒光素酶基因標記的人肺癌細胞株 A549-LUC細胞

裸鼠尾靜脈注射成瘤：取生長良好的細胞消化后制成細胞懸液，計數后取100μl（含2*106個細胞）的細胞懸液經尾靜脈接種于裸鼠，每天正常飲食。
注射細胞28d后，進行活體成像。

小動物活體成像操作步驟：
麻醉小鼠：3%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉小鼠。
注射熒光底物：腹腔注射D熒光素鈉鹽，按10 uL/g體重濃度，加入相應體積的15 mg/mL熒光素工作液。注射后10分鐘，就可以開始熒光活體成像。
打開小動物活體成像系統，根據目的蛋白的波長530-600nm，設置儀器參數選擇波長范圍為500-620nm。選擇fluorescent模式，把老鼠放入成像暗箱平臺，軟件控制平臺的升降到一個合適的視野，自動開啟照明燈（明場）拍攝第一次背景圖。下一步，自動關閉照明燈，在沒有外界光源的條件下（暗場）拍攝由小鼠體內發出的特異光子。明場與暗場的背景圖疊加后可以直觀的顯示動物體內特異光子的部位和強度，完成成像操作。值得注意的是熒光成像應選擇合適的激發和發射濾片，生物發光則需要成像前體內注射底物激發發光。

應用A549-luc原位成瘤可用于研究肺癌轉移的過程