模型評價
肝臟缺血損傷評分：
0分：無肝細胞損傷
1分：輕度損傷，特點為細胞質空泡化，病灶核固縮
2分：中度損傷，血竇膨脹，細胞溶質空泡化，細胞邊界模糊
3分：中度到重度損傷，凝固性壞死，大量血竇膨脹，紅細胞滲出到肝鎖，嗜伊紅細胞增多，中性白細胞著邊（附著于血管壁）
4分：嚴重壞死，失去肝臟結構，肝索崩解，出血，嗜中性粒細胞滲入

組織病理學
取肝左葉組織1.5cm×1cm×0.2cm于4%多聚甲醛溶液中固定24h后脫水，包埋，進行石蠟切片后行HE染色，tunel染色。作壞死評分。肝小葉結構嚴重破壞，網狀纖維支架塌陷，肝細胞壞死，空泡變樣，肝細胞索、肝竇充血腫脹，邊界不清，周圍有炎性細胞浸潤。

生化指標檢測：分別檢測術后0h、3h、6h、12h、24h及72h小鼠鼠血清中ALT（谷丙轉氨酶）、AST（天門冬氨酸氨基轉移酶）的水平，γ-谷氨酰基轉移酶(GGT)，總膽紅素(T-Bil)，直接膽紅素(D-Bil)，間接膽紅素(I-Bil)，總膽汁酸(TBA) 。

流式檢測：
1. 樣本前處理
①剪碎：將消化液中的組織充分剪碎
②加入消化液：每個肝組織加入5ml消化液
③消化：37℃消化 45min
④ 中止：消化完的組織加入終濃度為10%FBS的1640 10ml，終止酶反應。
⑤過濾：將組織懸液經200目濾網過濾
⑥洗滌：收集單細胞懸液至于50ml EP管中，2000rpm 離心10min。
⑦疊層：用小鼠淋巴細胞分離液疊層處理
⑧ 收細胞：吸取位于中間的透明細胞層，FACs buffer 離心洗滌細胞一次。

2. 流式染色：
①FcR封閉：加入1% FcR 阻斷劑（anti CD16/32 antibody），每樣本100ul。4℃ 孵育30min，FACs buffer 離心洗滌。
②樣本表面抗體工作液：
配置混合抗體工作液，每樣本100ul；
加入抗體工作液后，4℃ 孵育避光30min，FACs buffer 離心洗滌。
PerCP anti-mouse CD11b
PE/Cy7 anti-mouse Ly-6G
FITC anti-mouse CD45
PE anti-mouse F4/80

3.樣本胞內染色：
加入固定破膜液50ul，用槍頭輕柔吹打重懸，室溫避光45min。完成后，加入1x perm/wash buffer洗滌。
4.染色完成，重懸細胞：
樣本染色完成（每樣本使用200ul FACs buffer重懸），4℃ 避光保存，待上機。
5.流式上機：
上機樣本，收集總數目50萬/細胞。

應用SPSS軟件進行統計分析，計量資料以均數±標準差（x ±ｓ）表示，采用ｔ檢驗，組間比較采用單因素方差分析，P<0.05表示有顯