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急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)小鼠模型

歡迎咨詢:025-8666 8061
  • 編號DSI626Mu01
  • 物種Mus musculus (Mouse,小鼠)
  • 下載英文說明書 中文說明書
  • 規格每例
  • 價格 ¥ 840

基礎信息
  • 原型物種

  • 來源LPS致呼吸窘迫綜合征

  • 模式動物品系SPF級C57bl/6小鼠,雄性,周齡為8w-10w,體重為30g-35g。

  • 實驗分組實驗分六組:正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組。

  • 實驗周期1 week

  • 建模方法模型建立:經腹腔麻醉小鼠,采用暴露式氣管切開滴注的方法,經氣管向肺內滴注LPS(給藥劑量6mg/kg)而后將小鼠直立,垂直旋轉小鼠,使藥物在肺內均勻分布,從而建立內毒素性急性肺損傷小鼠模型?;蛘週PS經尾靜脈或者腹腔給藥,從而建立全身性炎性反應導致的ARDS模型。
    在氣道滴注LPS 6小時、12小時、24小時及48小時后,各取3只小鼠處死并收集支氣管肺泡灌洗液(BALF)及肺組織。
    樣本收集:
    支氣管肺泡灌洗液(BALF)抽取方法:小鼠取血后,開胸,分離縱膈,注射器抽取3ml生理鹽水從氣管插管推入肺中,每次反復灌洗3次后抽出灌洗液,肺泡灌洗液以4℃ 3000r/min離心15min,取上清。
    小鼠肺組織收集:肺組織的獲取及處理:經腹腔內注射麻醉小鼠,用肝素化的生理鹽水1ml經右心室心腔沖洗做抗凝處理,即刻從胸腔中取不同部分肺組織標本。

  • 應用疾病模型

模型評價

Diff-Quik 染色和細胞計數:
獲得BALF進行Diff-Quik染色后,顯微鏡下觀察計數計數中性粒細胞、巨噬細胞和淋巴細胞。

肺的濕/干重比:
肺的濕/干重比是反應肺水腫的直接指標,也是反應肺損傷嚴重程度的敏感指標。每組處死動物、剪斷氣管后取全肺,稱濕重,然后將肺置于65℃恒溫箱中干燥,24h 后取出稱干重,計算肺濕/干重比值。

伊文氏藍測定肺通透性:
在實驗結束前30min靜脈注射伊文氏藍(EBD),30mg/kg,實驗結束后,開胸剪開右房,沖洗肺循環,完整取出雙肺,剪去氣管,清洗擦干肺組織,稱重后勻漿,以每100mg肺組織1ml的甲酰胺浸泡肺勻漿,37度下孵育24小時,5000r/min離心,取上清測EBD濃度。

組織病理學

肺損傷后的組織病理觀察(HE染色) :
取右肺4%多聚甲醛固定,然后將肺組織常規脫水,石蠟包埋,切片(厚度為5μm),HE染色。評分方法:取6個視野進行出血及水腫評分。

標志因子水平

使用ELISA試劑盒檢測肺泡灌洗液(BALF)中TNF-a、IL-6和IL-1β等細胞因子的含量。

統計學分析

應用SPSS軟件進行統計分析,計量資料以均數±標準差(x ±s)表示,采用t檢驗,組間比較采用單因素方差分析,P<0.05表示有顯


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