原型物種
來源
模式動物品系
實驗分組
實驗周期
建模方法
應(yīng)用
1、大鼠坐骨組織病理檢查
坐骨神經(jīng)組織在4%多聚甲醛中固定24 小時后,包埋成石蠟塊。石蠟塊放在-20℃冰箱中冰一下,在切片機上進行切片,切片厚度4um,置于水槽中展開、撈片和貼片。石蠟切片切好后需要烤片,60℃烤片2 小時。進行Loyez蘇木精染色,光鏡下觀察再生髓鞘的情況。
2、 TUNEL檢測坐骨神經(jīng)組織凋亡情況
坐骨神經(jīng)組織切片脫蠟,蛋白酶K室溫下消化,TDT酶反應(yīng)液37℃孵育 1 h,0.3%H2O2抑制內(nèi)源性過氧化物酶,Streptavidin-HRP 室溫5min,DAB 顯色,蘇木精復(fù)染。陰性對照采用無酶標記液(去除TDT)代替TDT酶反應(yīng)液。凋亡細胞核呈棕褐色顆粒,光鏡下觀察并計數(shù)凋亡細胞。
3、電鏡觀察自噬情況
坐骨神經(jīng)組織2.5%戊二醛液固定,制備電鏡樣品,利用電鏡在超微結(jié)構(gòu)水平觀察坐骨神經(jīng)組織中自噬情況。
應(yīng)用SPSS軟件進行統(tǒng)計分析,計量資料以均數(shù)±標準差(x ±s)表示,采用t檢驗,組間比較采用單因素方差分析,P<0.05表示有顯
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