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動物行為及影像學(xué)服務(wù)

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皮膚光老化(SP)小鼠模型

歡迎咨詢:025-8666 8061
  • 編號DSI672Mu01
  • 物種Mus musculus (Mouse,小鼠)
  • 下載英文說明書 中文說明書
  • 規(guī)格每例
  • 價格 ¥ 1500

基礎(chǔ)信息
  • 原型物種

  • 來源UVA,UVB紫外導(dǎo)致皮膚老化

  • 模式動物品系SPF級ICR小鼠,健康,雄性,6~8W。

  • 實驗分組實驗分六組:正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組。

  • 實驗周期4-6 weeks

  • 建模方法雄性ICR小鼠,年齡約6周。小鼠在正常溫度下(23±2℃)濕度(55%±10%)和光照(12小時光照/ 12小時黑暗,無紫外線照射)喂養(yǎng)。喂養(yǎng)一周,等小鼠適應(yīng)了環(huán)境,用8%硫化鈉在小鼠的背部剃出超過2厘米x3厘米的脫毛區(qū)。

       紫外照射方法:2根UVB燈管和4根UVA燈管(40W,北京電光源研究所)并列穿插安放至自制福照箱中作為紫外福照光源。利用紫外照度儀(UV-B紫外輻照計、UV-A紫外輻照計 北京師范大學(xué)光電儀器廠 )測定UVA和UVB的輻射強度。造模前,UV燈管預(yù)熱10 min,待光源穩(wěn)定后將實驗鼠放入自制的鼠籠內(nèi)(使小鼠間不能相互攀爬、站立),并放入箱照箱內(nèi),鼠籠與UV燈管相距30 cm,根據(jù)預(yù)試所得最小紅斑劑量(MED)及光源強度調(diào)節(jié)福照時間,照射期間用排氣扇降低箱體溫度。第1周按1個MED的劑量進行照射,每周照射3次,往后每周照射劑量比前周遞增1個MED,直至第4周4個MED為止,之后保持4個MED直至第8周實驗結(jié)束。模型組小鼠背部皮膚出現(xiàn)明顯增厚、皺紋粗深、松弛等光老化皮膚表征,說明小鼠皮膚光老化造模成功。
       MED測定方法:對預(yù)實驗小鼠分別采用30mJ/cm2、60mJ/cm2、90mJ/cm2、120mJ/cm2、150mJ/cm2、180mJ/cm2的紫外福照劑量對其背部皮膚進行輻照,照射后24h觀察小鼠背部皮膚出現(xiàn)肉眼可見紅斑所需劑量為最小紅斑劑量(MED)。

  • 應(yīng)用n/a

模型評價

1.最小紅斑劑量(MED)劑量的確定:
選用2根UVB燈管和4根UVA燈管,造模前,UV燈管預(yù)熱10 min,鼠籠與UV燈管相距30 cm(此時輻照儀測的 UVA 的總輻照量是3.25 uW/cm2 左右;UVB 的總輻照量是0.134 uW/cm2 左右;這個值略有波動)。
選8只ICR小鼠,用剃毛器將小鼠背部的毛剃掉,再使用8%硫化鈉將殘留的毛發(fā)脫干凈,然后設(shè)置4個不同輻照的時間點:分別照射10分鐘、15分鐘、20分鐘、30分鐘,每個時間點2只小鼠,到輻照時間點,取出小鼠,正常飼養(yǎng),第2日觀察小鼠背部的紅斑情況。輻照10分鐘和15分鐘的小鼠,無明顯紅斑;輻照20分鐘的小鼠能看到輕微的紅斑,輻照30分鐘的小鼠,紅斑很明顯。此處選用輻照20分鐘,作為預(yù)試所得最小紅斑劑量(MED)
1個MED=(3.25 uW/cm2+0.134 uW/cm2)*20分鐘*60=4 mJ/cm2

2.全鼠背部拍照
  于第4周以及第8周取樣前,拍攝全鼠背部照片,以確定是否出現(xiàn)光老化特征(皺紋粗深、松弛等)。
3. 免疫指標: 脾臟和胸腺指標的測定
  小鼠稱重并執(zhí)行頸椎脫位,并立即從小鼠中取出脾臟和胸腺,立即稱重。胸腺和脾臟指數(shù)根據(jù)下述方程
  計算:胸腺或脾臟指數(shù)(mg/g)=胸腺或脾臟重量/體重。
  指數(shù)(TI)和脾指數(shù)(SI)可作為免疫指標。

組織病理學(xué)

組織學(xué)分析
在最終紫外照射后的24h內(nèi)取皮膚標本進行組織化學(xué)研究。小鼠皮膚樣品在4%緩沖中性福爾馬林溶液中固定24h,并嵌入石蠟中,連續(xù)切片。

標志因子水平

抗氧化指標
  1. 皮膚抗氧化指標分析
  取小鼠背部皮膚組織(約2厘米×3厘米,平均分為8塊,一塊加福爾馬林固定,用于病理檢測;一塊加RNA later保存,-80度保存,用于測序;剩余的6塊,每2塊放在一個管子里面,-80度保存)。
  2. 血清中抗氧化活性
  實驗結(jié)束時,小鼠禁食12小時,但允許自由進入水。血液從眼球中收集到離心管中。在離心后(7000 g,4℃,15分鐘)從血液樣品中獲得血清,然后冷凍并儲存在20℃直到分析

統(tǒng)計學(xué)分析

應(yīng)用SPSS軟件進行統(tǒng)計分析,計量資料以均數(shù)±標準差(x ±s)表示,采用t檢驗,組間比較采用單因素方差分析,P<0.05表示有顯


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