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  • [pics:title]

急性脊髓損傷(ASCI)小鼠模型

歡迎咨詢:025-8666 8061
  • 編號DSI545Mu01
  • 物種Mus musculus (Mouse,小鼠)
  • 下載英文說明書 中文說明書
  • 規格每例
  • 價格 ¥ 1560

基礎信息
  • 原型物種

  • 來源手術

  • 模式動物品系SPF級ICR小鼠,健康,雄性,8~12W

  • 實驗分組實驗分六組:正常對照組、模型組、陽性藥組、受試藥組三個劑量組。

  • 實驗周期4-6 weeks

  • 建模方法取 ICR 小鼠,戊巴比妥鈉麻醉后,采用椎板切除術暴露 T9-T10 處脊髓。然后采用脊髓打擊器,于暴露脊髓處施加 90 kilodynes 的力造成挫傷型脊髓損傷,SCI 后連續 10 天每天肌肉注射慶大霉素(8mg/kg)防止術后感染,并每天兩次人工膀胱按壓擠尿直至恢復自主膀胱活動為止(防止尿潴留)。
    處理一周后進行 BBB 評分評估小鼠后肢運動能力;
    BBB score=0 時,則模型構建成功。將構模成功的小鼠分為兩組,每組 8只,于挫傷型 SCI 處理 1week 后,于大鼠尾靜脈處進行注射處理(模型組只注射生理鹽水,治療組注射含有受試藥物的生理鹽水 )。
    SCI 后,16 只小鼠飼養 3week 時,根據SCI后 3 week 結果每組取 3 只效果最顯著的小鼠取脊髓進行病理學檢測,剩余 10 只小鼠繼續飼養并與5week,7week,9week進行BBB 評分和機械觸誘發痛檢測。SCI后 9week 時所有受損脊髓中心進行凍存或 OCT 包埋。

  • 應用疾病模型

模型評價

1. BBB test
于藥物注射后每隔一周進行 BBB test,直至移植后 8 周(即 SCI 后 3week、5week、7week、9week)。藥物注射后 2 周(即 SCI 后 3week)共 16 只小鼠進行行為學檢測數據,選擇變化顯著的 3 只小鼠(每組 3 只,即 6 只小鼠)的脊髓組織進行病理學檢測。剩余 5 只小鼠(每組 5 只,即 10 只小鼠)依舊隔一周(即 SCI 后 5week、7week、9week)進行 BBB test。分值范圍為0-21分,其中0分代表后肢完全失去運動功能,21分代表后肢運動功能基本正常。
2. Mechanical allodynia test (機械觸誘發痛檢測)
使用 Von Frey 測痛套件,記錄縮足的壓力(g),2 分鐘時間間隔內測量 4 次,剔除最大值和最小值后獲取的中間值作為痛閾(g)。
脊髓損傷模型的建立及術后小鼠情況:
所有實驗小鼠在打擊時均出現痙攣性擺尾,雙下肢及軀體回縮撲動,隨后雙下肢癱瘓,損傷節段脊髓硬膜完整、出血、水腫。所有麻醉后小鼠于術后蘇醒,出現雙下肢癱瘓,運動、感覺功能喪失,依靠雙上肢移動軀體,頭頸部活動正常。術后1d,所有小鼠BBB評分均小于1分,活動明顯減少,進食、飲水量減少,協助排尿7d后大部分小鼠恢復自主排尿功能。

機械觸誘發痛檢測:將小鼠置于金屬網格的架子上使之適應環境,采用Von Frey絲自足底下方垂直剌激后爪底皮膚表面,能引起陽性縮爪反應所需的最低力度記為縮爪閾值,造模后小鼠的PWTs值較正常小鼠均下降。

組織病理學

3.免疫熒光
藥物注射后兩周,取受損脊髓組織,石蠟切片后,檢測其中 MAP-1 的表達分布。
4.小膠質細胞/ 巨噬細胞檢測— 激光共聚焦
藥物注射后兩周,取受損脊髓組織,石蠟切片后,檢測其中 ED1(小膠質細胞/巨噬細胞活化 marker)。

統計學分析

應用SPSS軟件進行統計分析,計量資料以均數±標準差(x ±s)表示,采用t檢驗,組間比較采用單因素方差分析,P<0.05表示有顯


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