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抽動穢語癥(TS)大鼠模型

歡迎咨詢:025-8666 8061
  • 編號DSI550Ra01
  • 物種Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
  • 下載英文說明書 中文說明書
  • 規格每例
  • 價格 ¥ 1200

基礎信息
  • 原型物種

  • 來源亞氨基二丙腈(IDPN)致抽動穢語癥

  • 模式動物品系SPF級SD大鼠,健康,雄性,體重為180g~200g

  • 實驗分組將大鼠適應性喂養后,隨機分為六組:正常對照組、模型組、陽性藥組(鹽酸硫必利片)、受試藥組三個劑量組,每組10只動物。

  • 實驗周期7d

  • 建模方法兒童抽動癥或多發性抽動癥、妥瑞氏綜合征 (Tourette syndrom,TS),是一種多見于兒童時期的慢性神經精神障礙性疾病。其臨床表現以慢性、波動性、多發性運動肌突然快速、重復的抽動,并伴有不自主發聲和語言障礙,以及行為障礙為主,嚴重者可引發精神異常、強迫癥等行為紊亂,干擾患兒的正常學習和生活。其發病原因尚不明確,可能與遺傳、免疫、心理、神經遞質失衡等多方面因素相關。其中以中樞神經系統單胺類遞質失衡造成 TS 發病機制的學說占據了主導地位,因此西醫在 TS 治療中多選取DA受體阻滯劑。英國的開放性研究顯示,鹽酸硫必利片目前正成為一種被廣泛運用的藥物,該藥作為神經鎮靜類藥物,與非神經鎮靜類藥物如可樂定等均以被不同程度驗證。

    采用 Diamond 等創立的神經毒素全身用藥法建立 TD 模型,將 IDPN 溶于生理鹽水,按照給藥劑量每日 150mg/kg,給藥體積 0.1ml/100g 的方法腹腔注射,1 次/d,連用 7d。IDPN用藥7d 后出現頭部抽動、口腔運動、舔食前爪等行為,其中頭部抽動的刻板行為明顯、易分辨,且抽動頻率高,作為該模型成功的標準。
    造模周期:7天。SHAM組使用生理鹽水進行注射,其余操作同模型組。
    取材:末次給藥后夜間禁食不禁水,每組大鼠隨機選取 5 只,斷頭后取血放入EDTA 抗凝管中,冷凍離心( 3000 rpm,10 分鐘) ,取上清液放于-80℃ 冰箱保存。并在冰盒上快速剝離大鼠紋狀體并放入凍存管中,置于液氮中保存。

  • 應用用于篩選預防和治療抽動癥的藥物

模型評價

1.行為學實驗評估標準
運動行為評估標準:
0 分:安靜或正常活動;
1 分:過度興奮;
2分:探究行為增加,不連續吸鼻;
3 分:不停跑動;
4分:不停跑動伴有驚跳。
2.刻板行為評估標準:參照 Diamond 評分法
0 分:無刻板運動;
1 分: 軀體旋轉行為( 順時針或逆時針的旋轉行為);
2 分: 頭和頸部的上下運動過多(頭頸部和地面垂直方向的一種異常運動);
3 分:頭頸部的上下運動過多加旋轉運動;
4 分:頭向側擺,合并頭和頸部的上下運動過多。
行為學評估時間: 造模后以及灌藥過程中每隔 7 天進行行為學實驗,共進行 5 次行為學測試。
3.Morris水迷宮
實驗分為定位航行實驗和空間探索實驗。
定位航行實驗:大鼠連續接受5天的訓練,每天4次,每次時間間隔30min,記錄下分別大鼠從圓形水池的4個象限入水點入水,找到平臺所需要的時間,即逃避潛伏期。4次潛伏期的平均成績作為當日的最終結果進入到最后統計。
空間探索實驗:實驗的第6天,撤去平臺,從距離平臺的最遠端入水后,將大鼠放入水中,記錄下30s內小鼠的游泳軌跡,并觀察分析小鼠在目標象限的停留時間,以及它的穿越平臺的次數。以此評價動物對獲取信息的儲存、記憶能力。
4.曠場實驗:
實驗前一天將大鼠放入實驗環境中適應30min。實驗場地為500×500×300mm曠場,周壁的顏色為黑色,曠場底面被平均分為25個4×4 個小方格。正上方架攝像頭,視野覆蓋整個曠場。將動物放置在正中央格,同時進行攝像和計時,時間為5 min。通過計算機示蹤分析系統來分析動物在一定時間內的活動狀態。實驗室保持安靜,室溫為20 ℃左右,光線充足。觀察指標:方格間穿行次數(動物的四肢從一個格進入另一個格為穿行一次)、直立次數(動物雙前肢同時離地,或者雙前肢放在墻壁上算作直立一次)、中央格停留時間、穿過中央格的次數。

標志因子水平

ELISA 試劑盒檢測血清和紋狀體組織中多巴胺(DA)、多巴胺受體2(D2R)的含量。
ELISA檢測大鼠外周血中的抗炎細胞因子IL-4、IL-10、TGF-β及炎性細胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-12的表達。

統計學分析

應用SPSS軟件進行統計分析,計量資料以均數±標準差(x ±s)表示,采用t檢驗,組間比較采用單因素方差分析,P<0.05表示有顯


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