原型物種
來源
模式動物品系
實驗分組
實驗周期
建模方法
應用
1.一般情況觀察:
觀察大鼠皮毛色澤、精神狀態及活動度。
2.體質量增長率計算:
適應性飼養結束后秤取實驗大鼠體質量作為初始體質量,實驗期間觀測每日體質量,求得體質量增長率。
體質量增長率=(當日體質量一初始體質量)/初始體質量x100%。
3.糞便顆粒數和4糞便干濕重比
于Day1、Day3、Day5、Day7-9收集每只大鼠的2個小時的糞便(固定時間點9:00~11:00),統計2個小時的排便顆粒數。于Day1、Day3、Day5、Day7-9取每只大鼠的1~2粒糞便,稱濕重稱質量后置于50度恒溫箱烘烤 ,再稱干重。
糞便含水量= (濕重-干重)/濕重x100%。
腹壁撤退反射(AWR評分)
AWR評分于Day9進行。大鼠在實驗前24 h禁食不禁水,輕觸其肛門部使其排盡大便。大鼠輕度麻醉狀態下從肛門緩慢插入未充氣涂石蠟油后帶球囊的導管,球囊末端距肛門約1 cm,在肛門外1cm處將其固定在大鼠尾根部后。每只大鼠給與球囊擴張3次,容量分別為1.0、1.5、2.0 ml,每次擴張持續3-5 min,間隔30 s(以防腸道缺血)。每個容量重復3次,取平均值。
4.AWR評分標準:0分,給予結直腸擴張刺激時大鼠情緒基本穩定;1分,給予刺激時變得不穩定,偶爾扭動頭部;2分,腹背部肌肉輕微收縮但腹部未抬離地面;3分,腹背部肌肉較強烈收縮并把腹部抬離地面;4分,腹部肌肉強烈收縮,腹部呈弓形并把腹部、會陰部抬離地面。
AWR評分標準:
0分,給予結直腸擴張刺激時大鼠情緒基本穩定;
1分,給予刺激時變得不穩定,偶爾扭動頭部;
2分,腹背部肌肉輕微收縮但腹部未抬離地面;
3分,腹背部肌肉較強烈收縮并把腹部抬離地面;
4分,腹部肌肉強烈收縮,腹部呈弓形并把腹部、會陰部抬離地面。
5.曠場實驗檢測大鼠的自主行為
曠場實驗所用實驗箱為高30~40cm,底邊長為100 cm的曠場,周壁的顏色為黑色,曠場底面被平均分為25個4×4 cm的小方格。正上方架攝像頭,視野覆蓋整個曠場。將大鼠放置在正中央格,同時進行攝像和計時,時間為5 min。通過計算機示蹤分析系統來分析大鼠在一定時間內的活動狀態。實驗室要保持安靜,室溫為20 ℃左右,光線充足。觀察指標:方格間穿行次數(動物的四肢從一個格進入另一個格為穿行一次)、直立次數(動物雙前肢同時離地,或者雙前肢放在墻壁上算作直立一次)、中央格停留時間、穿過中央格的次數。
研究認為,經過的格子數代表動物的興奮性;站立的次數代表動物對陌生環境的適應能力。
6.胃排空測定
每只大鼠于Day10給予2ml阿拉伯膠+活性炭粉混合糊狀物灌胃,30min后處死并開腹,自門至為腸吻合口取胃,稱胃全重以及胃凈重。
胃排空率(100%):(1-(胃全重-胃凈重)/炭粉混合糊狀物重)x100%。
7.小腸推進比測定
將大鼠取出上端自幽門、下端至回盲部的腸管,鋪直后測量幽門至回盲部全長(小腸總長度)及幽門至炭末前沿的距離(炭末推進長度),計算小腸推進百分率:
小腸推進比(100%)=活性炭推進距離/小腸全長x100%。
取材:
將大鼠處死,取結腸,在距肝門口2cm出取結腸組織,分為2份,一份10%中性甲醛溶液固定。另一份放置-80度保存,可進行后續分子生物學檢測。
處死大鼠,大鼠仰臥固定在手術臺上,充分暴露腹主動脈,用真空采血管從從腹部主動脈采血,收集血液后,室溫靜2h,然后于4℃3000r離心10分鐘提取血清,放入-80冰箱凍存。
結腸組織進行石蠟包埋,切片(5um),進行HE染色。
應用SPSS軟件進行統計分析,計量資料以均數±標準差(x ±s)表示,采用t檢驗,組間比較采用單因素方差分析,P<0.05表示有顯
Copyright ? 2021 江蘇悟空生物科技有限公司 All Rights Reserved. 蘇ICP備2021047265號-1