原型物種
來源
模式動物品系
實驗分組
實驗周期
建模方法
應用
1.肺損傷后的大體觀察:
肺損傷后有肉眼可見肺部大面積出血滲出,可以直觀的反映肺損傷程度。
2.肺的濕/干重比:
肺的濕/干重比是反應肺水腫的直接指標,也是反應肺損傷嚴重程度的敏感指標。建模后,大量液體滲出至肺泡和肺間質,導致肺的重量增大,而肺的干重則不受影響。處死大鼠、剪斷氣管后取全肺,稱濕重,然后將肺置于65℃恒溫箱中干燥,24h 后取出稱干重,計算肺濕/干重比值。
取左肺4%多聚甲醛固定,然后將肺組織常規脫水,石蠟包埋,切片(厚度為5μm),HE染色。HE染色肺組織學評價可以直觀的反應肺損傷的程度,ALI組織病理學主要表現為肺泡中性粒細胞及紅細胞的滲出,肺泡壁透明膜的形成。HE染色后可在低倍鏡下觀察到整個左肺組織的炎癥細胞浸潤、水腫以及損傷,評估肺部損傷分布情況;而高倍鏡下則可以對肺泡結構進行辨認,對肺損傷程度進行評估和評分。
評分方法:取6個視野進行出血及水腫評分。
0分:沒有損傷
1分:<25%的損傷面積
2分:25%~50%的損傷面積
3分:50%~75%的損傷面積
4分:>75%的損傷面積
左肺葉氣管解剖,行支氣管插管,預冷的(4度)無菌生理鹽水l ml進行支氣管肺泡灌洗3次,共3 m1,回收支氣管肺泡灌洗液(BALF)至無菌離心管中, 1500 r/min,離心10 min,收集上清液,-80℃保存,使用ELISA試劑盒檢測肺泡灌洗液中TNF-a、IL-6和IL-1β等細胞因子的含量。
應用SPSS軟件進行統計分析,計量資料以均數±標準差(x ±s)表示,采用t檢驗,組間比較采用單因素方差分析,P<0.05表示有顯
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